Saaalut !
Alors lorsqu’on a un plasmide circulaire le petit mnémo c’est que le nombre de site de restriction = nombre de produits visibles sur ton electrophorèse.
Maaais c’est
Pas tjrs le cas car comme dans cet exo il faut faire attention au PM initial de ton plasmide .
Mais comment le trouver ?? Alors ton cours te dit que tu peux estimer la taille de ton plasmide que lorsque celui-ci est LINÉAIRE !!
Ainsi ce n’est pas la piste 1 qui te donnera le poids de ton plasmide vu qu’il est natif donc « en double cercle » ( pour que tu visualises ).
Ni ta piste 2, car il n’y a que l’hydrolyse d’un brin sur les 2.
Et tu l’as deviné c’est ta piste 3!! Pk? Parce qu’on te dit entre parenthèse que ton plasmide ne possède qu’un site de restriction pour ECOR1.
Donc elle va coupé une fois ton plasmide sur son site spécifique et là ton plasmide est bien linéaire .
Tu peux donc estimé ton plasmide à environ un peu plus de 4,36 kpb.
Concernant le nombre de site de restriction de BamH1 sachant que tu connais son poids moléculaire je te laisse deviner combien il existe de site de restriction de cette enzyme dans ce plasmide . Attention ici la technique nombre de tache= nombre de site ne fonctionne pas !!
( biig aide: tu peux t’aider de la grosseur des taches visualisées sur ton electrophorese en comparant à ceux de tes marqueurs de taille)
Si c’est toujours pas clair après l’ED n’hésites pas !!
Boon courage
